1、检查U盘和电脑的连接

如果启动U盘不能用了，首先需要检查U盘和电脑的连接是否良好。可以尝试将U盘插入其他USB接口，或者将其他设备插入该USB接口，确定是否是接口的问题。同时，也可以尝试用其他U盘来连接电脑，检查是否是电脑的问题。

2、检查U盘是否损坏

如果连接良好但是仍然不能使用启动U盘，那么需要检查U盘是否损坏。可以尝试将U盘插入其他电脑或者设备，检查是否可以正常识别。如果其他设备也无法使用，那么很有可能是U盘损坏了。

若是发现U盘有损坏，可以尝试将其修复。常见的修复方式有在磁盘管理器中删除卷、格式化、重新分区等方法，但在此之前必须先备份U盘中的数据。若是U盘无法修复，则需要更换新的U盘。

3、检查启动U盘是否正确制作

如果U盘未损坏，但是仍然不能使用作为启动盘，则需要检查U盘是否正确制作。制作启动U盘需要注意U盘的格式化，容量大小以及启动盘制作的工具等。如果在制作过程中出现了错误，会导致U盘不能正常使用作为启动盘。

建议重新制作一次启动U盘，并确保在制作过程中没有出现异常。

4、检查系统BIOS设置

如果以上步骤均未能解决问题，则需要检查系统BIOS设置。在系统启动时按下对应的按键（一般是DEL或F2）进入到BIOS设置界面，检查U盘启动的顺序是否正确，即首先启动顺序是否设置成了U盘作为首选启动设备。

如果设置正确但是仍然无法启动，则需要检查系统是否支持U盘启动。一些老旧的电脑或者低配电脑可能不支持U盘启动，需要使用其他启动设备。